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凝胶过滤层析中和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同
作者:  Admin       浏览:       发布时间:  2021-07-30
  凝胶过滤层析中和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同
 
  凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。
 
  而在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中,蛋白质的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。进入分离胶后,由于聚丙烯酰胺的分子筛作用,小分子的蛋白质可以容易的通过凝胶孔径,阻力小,迁移速度快;大分子蛋白质则受到较大的阻力而被滞后,这样蛋白质在电泳过程中就会根据其各自分子量的大小而被分离。整块胶板相当于一个分子筛。
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  分子筛的第一个作用是晶体的外表面吸附多种吸附物。对于分子筛的研究表明,其外表面提供了一个精确的被吸附的分子尺寸。如果被吸附物的分子超过该尺寸,就不能进入晶体内部,只能被吸附在外表面。表面吸附作用(也发生在非结晶体的表面,如硅胶),这是很弱的,而在晶体内部有成千上万的晶体空隙和槽,进一步吸附分子。分子筛由硅、铝和氧原子组成。这些分子的离子电荷在稳定的晶体中加起来的总和应是零。为平衡正负负荷,加入钾、钠、钙等正电荷离子。带有正负离子的巨大的面被称做吸附场。
 
  在吸附物与被吸附物之间有很强的吸引力,需要很大能量的(一般是热能)才能消除吸引力,还原成筛子。随着被吸附物的浓度增加,密度电荷场增强以至于几乎没有几层被吸附分子存在。最终,被吸附物接近满负荷,孔被填满,类似于毛细管冷凝。如果水和苯(比如)分子都进入13X晶体,都有同样的机会找到电荷场,吸附到晶体中,因为两个分子都具有极性。
 
  可是,有些分子像氮气、氩气因为没有明显的极性,他们可能很弱地吸附在晶体上,当大量的极性分子涌入时被轻易地替换掉。在分子筛的吸附过程中,热能源释放到周围。

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